1. Hvad omfatter ikke-kliniske undersøgelser?
Svar:Ikke-kliniske eksperimenter omfatter farmakologiske undersøgelser, generelle toksicitetstests, toksikokinetik og ikke-kliniske farmakokinetiske eksperimenter, reproduktionstoksicitetstests, genotoksicitetstests, carcinogenicitet og andre tests (fototoksicitet, afhængighed, immunotoksicitet) osv. I tilfælde af kombinationsterapi kan der også udføres ikke-kliniske sikkerhedsundersøgelser af kombinationsterapi. For en vis høj andel (mere end 10 % af den samlede systemiske eksponering og eksponeringsniveauet i dyreforsøg er lavere end eksponering hos mennesker), kan det være nødvendigt at udføre ikke-kliniske sikkerhedsundersøgelser af metabolitter.
2. Hvad er formålet med ikke-klinisk sikkerhedsvurdering?
Svar:Formålet med ikke-klinisk sikkerhedsevaluering omfatter generelt at belyse toksicitetsreaktionskarakteristika relateret til målorganer, dosisafhængighed, eksponeringsforhold og potentiel reversibilitet. Denne information kan bruges til at estimere den sikre startdosis og dosisinterval for humane kliniske forsøg (som tidligere nævnt skal NOAEL opnås i toksikologiske eksperimenter til beregning af MRSD, den maksimalt anbefalede startdosis), og til at bestemme kliniske monitoreringsindikatorer for potentielle bivirkninger.
3. Hvilke ikke-kliniske undersøgelser er nødvendige for første-i-menneskeforsøg?
Svar:For dette spørgsmål er det først nødvendigt at afklare typen af lægemiddel. ICH M3 (R2) er anvendelig til almindelige situationer i lægemiddeludvikling og giver generelle vejledningsprincipper. For biologiske lægemidler bør ikke-kliniske undersøgelser udføres i overensstemmelse med kravene i ICH S6.
⑴Farmakokinetik:Inden indsendelse af IND er data om forsøgsproduktets metabolisme i forskellige arter og in vitro metabolismedata hos mennesker samt plasmaproteinbindingshastighed tilstrækkelige. Oplysninger om absorption, distribution, in vivo-metabolisme og udskillelse bør udfyldes før store -kliniske forsøg (normalt fase 3). PK-absorptionseksperimenter udføres generelt i flere arter før IND-indsendelse og PCC-bestemmelse for bedre at forstå lægemidlets PK-karakteristika i forskellige arter, selvom det ikke er påkrævet her, hvilket er lidt mærkeligt.
⑵Sikkerhedsfarmakologi:Evaluering af virkningerne på kardiovaskulære, centralnerve- og respiratoriske systemer bør afsluttes før indsendelse af IND, som er en kombination af sikkerhedsfarmakologiske standardtests. Supplerende sikkerhedsfarmakologiske eksperimenter kan udføres under kliniske forsøg, hvis det er nødvendigt.
⑶Toksicitet ved gentagen dosis:Generelt arrangeres en kort- kronisk toksicitetstest baseret på IND's tidlige doseringsskema. Hvis doseringsperioden skal forlænges senere, kræves en længere- kronisk toksicitetstest for at understøtte det.
⑷Genotoksicitet:Med relativt lave omkostninger kan kombinationen af genotoksicitetstest udføres før indsendelse af IND.
⑸Kræftfremkaldende egenskaber:Kræftfremkaldende test bør afsluttes før lægemiddelgodkendelse.
⑹Reproduktionstoksicitet:Observationer og evalueringer af reproduktionssystemet bør inkluderes i toksicitetstest med gentagne doser før indsendelse af IND til foreløbig vurdering af reproduktionstoksicitet, hvor streng prævention i kliniske forsøg er tilstrækkelig. Fase I/II reproduktionstoksicitetsundersøgelser bør afsluttes før store-kliniske forsøg, og fase III reproduktionstoksicitetsundersøgelser bør afsluttes før godkendelse.
⑺Fototoksicitet:Fototoksicitetsvurdering skal være afsluttet før indsendelse af IND. Hvis den molære absorptionsevne er større end 1000 M-1cm-1, anses der for at være en risiko for fototoksicitet, og fototoksicitetstest bør udføres før kliniske forsøg i stor skala.
4. Hvordan skal doser fastsættes i toksikologiske tests? Hvordan skal den højeste dosis vælges?
Svar:Med henvisning til "Tekniske retningslinjer for toksicitetstests for gentagne doser af lægemidler," "I princippet bør høje doser inducere tydelige toksiske reaktioner hos dyr, lave doser skal være ækvivalente med eller højere end den effektive dosis til dyr eller klinisk brug, og mellemdoser bør indstilles mellem høje doser og lave doser baseret på toksicitetsmekanismen og toksicitets-dosis{0}-forholdet for toksicitet{0}."
I praksis er det, i betragtning af de dyre omkostninger ved toksikologiske tests, den mest omkostnings-effektive og arbejdsbesparende-metode at udføre en-dosisområdefindingstest (DRF) med nogle få ikke-menneskelige primater. Dosis for DRF-test bør også indstilles yderligere baseret på foreløbige sikkerhedsundersøgelser udført under tidlig PCC-bestemmelse og farmakologiske undersøgelser. Mange institutioner udfører nu også akutte toksicitetstests sideløbende med DRF-tests, som er ikke-GLP-tests, som nævnt i M3 (R2), efter 3R-princippet for at reducere brugen af dyr.
For lav-, medium- og højdosisgrupper bruges generelt et mellemrum på 2-3 gange. I formelle toksikologiske tests er den ideelle situation, at højdosisgruppen kan udvise tydelig toksicitet, og lav- eller mediumdosisgrupperne kan bruges som NOAEL.
Derudover giver M3 (R2) også standardsvar til valg af den højeste dosis. Enkelt sagt bør den højeste dosis i toksikologi enten være den maksimalt tolererede dosis (MTD) eller den maksimalt mulige dosis (MFD, som kan forstås som den maksimale dosis, som dyr kan tolerere baseret på produkt- og dyreegenskaber), eller den skal opnå eksponeringsmætning, eller eksponeringsniveauet skal være tilstrækkeligt højt (nå op på 50 gange den tilsigtede kliniske dosis). Generelt anses 1000 mg/kg/dag for at være tilstrækkelig, medmindre den tilsigtede kliniske dosis når 1g/dag, og eksponeringsniveauet på 1000 mg/kg ikke når 10 gange det kliniske eksponeringsniveau, i hvilket tilfælde du skal øge dosis yderligere til 10 gange det kliniske eksponeringsniveau eller 2000 mg/kg/dag eller MFD.
5. Hvilke undersøgelser inden for ikke-klinisk sikkerhedsforskning skal følge GLP, og hvilke gør ikke?
Svar:Farmakologiske og farmakokinetiske undersøgelser behøver ikke at følge GLP, mens undersøgelser af sikkerhedsfarmakologi, genotoksicitet, reproduktionstoksicitet og toksicitet ved gentagen dosis skal følge GLP.
6. Hvor lang er varigheden af ikke-kliniske toksicitetsundersøgelser med gentagen dosis?
Svar:Varighedskravene for at understøtte kliniske forsøgsadfærd og markedsgodkendelse er forskellige og skal være specifikke for doseringsperioden for kliniske forsøg. For patienter med multipel sklerose er den mindste planlagte kliniske forsøgsperiode to år. Derfor kræves et 6-måneders gnaver og 9-måneders ikke-gnaver kronisk toksicitetsundersøgelse, når man indskriver multipel sklerosepatienter i kliniske forsøg, hvilket er tilstrækkeligt til at understøtte markedsgodkendelse. For ikke-onkologiske lægemidler bruges et 4-ugers kronisk toksicitetsstudie generelt til at understøtte en doseringsperiode, der ikke overstiger 4 uger for førstegangs-i-menneskelige kliniske forsøg.
7. Hvordan vælger man forsøgsdyr til ikke-klinisk sikkerhedsvurdering?
Svar:Generelt bruges to typer dyr, hvor gnavere med rotter er det foretrukne valg, og ikke-gnavere med Beagle-hunde er det foretrukne valg. Selvfølgelig skal specifikke produktspecifikke-analyseprincipper også følges. For små molekyler bør udvælgelsen af arter hovedsageligt tage hensyn til forsøgsproduktets metaboliske egenskaber hos dyr, der ligner mennesker. Der kan henvises til "Analysis and Identification Test of Metabolites of Investigational Products in CD-1-mus, SD-rotter, Beagle Dogs, Cynomolgus Monkeys, and Human Liver Microsomes", der udvælger arter med metaboliske egenskaber, der ligner mennesker, det vil sige arter med lignende mængder og typer af metabolitter som mennesker. Derudover skal den udvalgte art være følsom over for forsøgsproduktet. Baseret på tidligere erfaringer, for et lægemiddel med lille molekyle, kan dets metaboliske egenskaber hos Beagle-hunde ligne mennesker, men med lav eksponering.
